biochimie et biotechnologies' (thème du congrès de Marrakech 2004) couvre les résultats de plusieurs travaux de recheche portant, entre autres, sur:
- Acétylation des protéines de pois dans un réacteur agité
Production de bactériocines anti-Listeria par Enterococcus faecium. Pour rappel, les bactériocines sont des peptides ou protéines produits naturellement par des souches bactériennes et ayant une activité antimicrobienne contre des bactéries .
Etude cinétique de la réaction d'acétylation des protéines de pois dans un réacteur agité
N. NASRALLAH, l. BOUCHENAFA & A. BENSMAILI
USTHB, Faculté de génie mécanique et génie des procédés,
Laboratoire de génie de la réaction chimique, BP 32 EL alia
Bab Ezzouar Alger, Algerie. E-mail: nas_nour@yahoo.fr
L'objectif
de ce travail consiste d'abord à étudier l'hydrodynamique
dans un réacteur agité avant d'effectuer la cinétique
de la réaction d'acétylation des protéines
de pois. L'étude de l'hydrodynamique dans un réacteur agité
en configuration ouvert et fermé en utilisant la distribution des
temps de séjours (DTS) a été effectuée pour
caractériser l'écoulement à l'intérieur du
réacteur. La technique la plus couramment utilisée est une
méthode conductimétrique (méthode des traceurs) ;
utilisant généralement la soude comme traceur et l'eau déminéralisé
comme fluide de travail.
Sur la base du temps de mélange, les résultats obtenus montrent
que la qualité de mélangeage est meilleure lorsque le réacteur
est muni de deux turbines montée sur un même arbre assurant
ainsi une bonne turbulence du fluide, ainsi que le système ouvert
présente les plus faibles valeurs de volume mort dans la plus part
des cas étudiés, cette caractéristique du mélange est déjà intéressantes pour d'éventuelles
applications industrielles. De plus, les industriels s'intéressent
beaucoup plus aux appareils qui fonctionnent en continu, car il bénéficient
les avantages de régime permanent et d'une assistance moindre.
Après la caractérisation du réacteur agité,
nous avons étudié la réaction d'acétylation
sur l'isolat de pois. L'acétylation intéressent les groupements
aminés des protéines. Au cours de la réaction, il
se produit une hydrolyse spontanée de l'anhydride en acide carboxylique
correspondant d'où une chute de pH compris entre 7 et 9. La modification
des protéines par acétylation permet d'augmenter
les propriété fonctionnelles tel que leur solubilité
en milieu aqueux et l'augmentation de leur propriété tensioactif
et en étudié en particulier la sélectivité de la réaction qui est en compétition avec la réaction
de l'hydrolyse de l'acide acétique.
Nous avons suivi d'une manière satisfaisante la cinétique
de la réaction d'acétylation des protéines de pois
dans un réacteur agité fermé par la méthode
conductimétrique au moyen d'une sonde Tacussel. Une étude
cinétique de la réaction qui permettra de déterminer
d'une part, les conditions opératoires optimales susceptibles de
conduire à des taux de conversion intéressants, et d'autre
part les paramètres cinétiques de la réaction tels
que ; la constante de la vitesse, ainsi que l'énergie d'activation
correspondante.
Mots-clés:
réacteur agité; acétylation, protéines, acétylation des protéines, pois, isolat de pois, hydrodynamique d'un réacteur
Purification et caractérisation d'une bactériocine anti-Listeria produite par Enterococcus faecium F420 isolé à partir de lait cru de chèvre
F. ACHEMCHEM1,2, J. ABRINI1 , M. MARTINEZ-BUENO2, E. VALDIVIA2 & M.
MAQUEDA2
1Département de Biologie, Groupe de Biologie Cellulaire et Moléculaire,
Faculté des Sciences, Université Abdelmalek Essaâdi,
Tétouan, Maroc, 2 Departamento de Microbiología, Facultad
de Ciencias, Universidad de Granada, Espagne
Les bactéries lactiques sont connues par leur capacité d'inhiber
dans les aliments le développement de bactéries pathogènes
et de détérioration. Cette capacité d'antagonisme
est attribuée à la production de métabolites antimicrobiens
tels que les bactériocines. Ces derniers sont des composés
protéiques secrétés dans le milieu extracellulaire
et qui présentent un mode d'action bactéricide. Enterococcus
faecium F420 a été isolé à partir de lait
cru de chèvre. La recherche de l'antagonisme bactérien dans
le milieu solide a été réalisé suivant la
méthode de double couches dans des conditions qui éliminent
l'effet de l'acide lactique et du peroxyde d'hydrogène. L'activité
antagoniste de la souche E. faecium F420 est dirigé essentiellement
contre Listeria monocytogenes et des souches du genre Enterococcus. Les
substances inhibitrices produites par la souche F420 sont détruites
par la trypsine et la protéase, ce qui indique que les agents actifs
sont de nature protéique. Ces substances retiennent leur activité
antimicrobienne après traitement à 100ºC pendant 5
min, 80ºC pendant 10 min et 60ºC pendant 30 min et elles sont
stables à pH acide et basique. La production de la bactériocine,
dénommée entérocine F420, commence dès le
début de la phase logarithmique de croissance de la bactérie
productrice. La purification de l'entérocine F420 a été
réalisée en trois étapes successives : chromatographie
sur gel d'amberlite XAD-16, suivie de chromatographie sur gel C-18
et finalement par chromatographie liquide haute performance en phase inverse
(RP-HPLC). La purification par RP-HPLC a révélé l'existence
d'un seul pic doté d'activité antibactérienne. La
masse Moléculaire de la bactériocine purifiée a été
estimée par spectrométrie de masse (MALDI-TOF-MS; Matrix-Assisted
Laser Desorption/Ionization Time-of Flight Mass Spectrometry) à
4628,45 Da. Le séquençage partiel du peptide F420 a montré
une grande homologie à l'entérocine P. La souche bactériocinogène
E. faecium F420 et sa bactériocine montrent des potentialités
très intéressantes pour leur application dans la lutte contre
Listeria monocytogenes dans des systèmes alimentaires. Cette application
concerne les produits laitiers en général et notamment le
jben de chèvre élaboré de façon artisanale
et dans des conditions hygiéniques no contrôlées.
Mots clés : Lait de chèvre, bactériocines, bactéries
lactiques, Enterococcus faecium, Listeria monocytogenes
ENSEIGNEMENT DE MASTER
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